Klinikken for drøvtyggere, LMU München blev kontaktet af en mælkeproducent med et besætningsproblem med hårtab hos BB-krydsningskalve i december 2010. Ifølge ejeren blev kalve af begge køn fra malkekvægsracedyr, der var avlet af forskellige BB-tyre ved kunstig befrugtning, påvirket i løbet af 5 år. Han oplyste, at disse kalve blev født med en normal hårpels. Fra 2- til 3-ugersalderen viste de dårlig sparsommelighed, overdreven skældannelse i nakke- og hovedområdet med områder, der blev alopecic kort tid efter, begyndende ved hovedet og udviklede sig til den dorsale midterlinje, nakke- og skulderområdet. I en alder af 8-10 uger begyndte der at vokse hår tilbage på de berørte områder hos alle kalvene. Besætningsdyrlægen begyndte at undersøge problemet på grund af ejerens økonomiske og velfærdsrelaterede bekymringer. Efter fysiske undersøgelser og udtagning af prøver af den angrebne hud kunne den henvisende dyrlæge ikke finde nogen tydelig årsag hos nogen af de berørte kalve. Der var ingen pruritus, der blev ikke fundet nogen ektoparasitter, og hudskrabninger gav ingen unormale resultater. De hudbiopsier, som den henvisende dyrlæge foretog, gav ikke noget resultat med hensyn til at fastslå årsagen til alopeci. Behandling af de ramte dyr med insekticider og vitaminpræparater til injektion forbedrede ikke tilstanden. Det var også overraskende, at renracede malkekalve på den samme bedrift efter sigende aldrig havde været ramt af denne sygdom. Efter samråd med besætningsdyrlægen blev tre dyr med typiske tegn henvist til klinikken med henblik på yderligere diagnostik, og der blev arrangeret et besøg i besætningen.
Efter ejerens mening var de tre henviste tyrekalve på 19, 28 og 42 dage gamle i forskellige stadier af samme tilstand. De ankom til klinikken i løbet af en periode på 3 måneder (januar-marts 2011). Den følgende behandling af kalvene var identisk for alle kalvene: Efter fødslen blev de adskilt fra deres respektive moder og blev opstaldet i enkeltboksbokse med halmstrøelse. I de første 7-10 dage af deres liv fik de 2 liter sødmælk fra deres respektive moder to gange dagligt. Derefter blev kalvene to gange om dagen fodret med 4 liter kommercielt mælkeerstatningsprodukt to gange om dagen. Hø, salt, mineralfoder, korn eller vand blev ikke tilbudt indtil dette tidspunkt. Ligesom alle andre ramte kalve fik de tre kalve en oral vitaminblanding efter tegn på begyndende sygdom samt en pour-on-behandling med et antiparasitært middel (Moxidectin Triclamox Rind Pour-on-Lösung ad us. vet.; moxidectin 0.5 mg/kg BM, triclabendazol 20 mg/kg BM), men hårtab progredierede uanset hvad.
Klinisk undersøgelse ved indlæggelse, procedure for blodprøvetagning og analyse
Umiddelbart ved ankomsten til klinikken blev der foretaget en klinisk undersøgelse i henhold til Dirksen et al. . Der blev taget blod fra hvert dyr ved punktering af halsvenen og anbragt direkte i S-Monovette (Sarstedt, Nümbrecht-Rommelsfeld, Tyskland), antikoagulerende (K3 EDTA, 1,6 mg/ml; Sarstedt) og blodgasmonovette-rør (50 IE/ml calciumbalanceret lithiumheparin; Sarstedt). Blodprøverne blev behandlet straks, og serumet blev høstet ved centrifugering ved 3000 rpm i 10 min. ved 25 °C. De serologiske parametre samt aktiviteten af glutathionperoxidase i fuldblod blev bestemt ved hjælp af et automatisk analysesystem (Automatic Analyser Hitachi 911; Roche Diagnostics, Indianapolis, IN). Hæmatologiske analyser blev udført med en automatisk hæmatologisk analysator (Sysmex F820; Sysmex, Norderstedt, Tyskland). Desuden blev koncentrationen af molybdæn i serum bestemt hos IDEXX VetMed Labor GmbH, Ludwigsburg, Tyskland. Hos to kalve (kalv 2 og 3) blev C-vitaminindholdet i serum, der blev opnået på indlæggelsesdagen, bestemt ved hjælp af væskekromatografi-massespektrometri (MVZ Labor Dr. Limbach, Heidelberg, Tyskland).
Der blev endvidere taget en 8 mm hudbiopsi af tre forskellige steder (et upåvirket, to angrebne steder) under lokalbedøvelse, fikseret straks i 10 % neutralbufferet formaldehyd og sendt til undersøgelse på Institut for Veterinærpatologi, LMU München. Formalinfikserede prøver blev rutinemæssigt paraffinindstøbt og behandlet til histologisk undersøgelse og farvet med hæmatoxylin og eosin (HE) og Giemsa.
Kliniske tegn og klinisk patologi
Tabel 1 viser baselinekarakteristika og resultater af klinisk undersøgelse af de tre kalve på tidspunktet for indlæggelse på hospitalet. De unormale kliniske fund omfattede følgende: unormal holdning med bagbenene samlet under maven (kalv 1 og 2), mens kalv 3 ikke bar vægt på det venstre bagben. Kalv 1 og 2 havde kolde ekstremiteter. Hos kalv 1 og 3 blev der konstateret en let rødme af tandkødet omkring fortænderne og en let øget rosa farve af slimhinderne. Auskultation af hjertet afslørede en uregelmæssig hjerterytme, men der var ingen mislyde og ingen udspilning af halsvenen (kalv 1 og 2). Der blev konstateret hypotermi hos to kalve (kalv 1, 35,9 °C; kalv 2, 37,6 °C), mens kalv 3 havde en forhøjet kropstemperatur (40,2 °C). Der blev ikke fundet sår ved inspektion af mundhulen og mellemrummene. Hydreringstilstanden var normal, som det fremgik af vurderingen af hudteltet og af øjenhullernes stilling. Hos to kalve (kalv 1 og 2) var der alopeci langs ryggen, på begge sider af halsen, på panden, omkring begge ører, begge kinder og omkring øjnene. Den røde hud i disse områder var delvist dækket af tykke skorper, som let kunne fjernes. Huden i de berørte områder var tør og kun let betændt; der blev ikke fundet erosioner (fig. 1). Kalv 3 viste derimod kun let skældannelse på forskellige dele af hovedet og halsen.
To besætningsrepræsentanter, der lider af alopeci. a-e: Kalv 1; f-j: Kalv 2. Hårtab på panden, omkring øjnene, på kinderne, langs ryggen og begge sider af halsen samt på begge albuer. Begge ørers basis er påvirket. Overdreven skældannelse med tykke, let aftagelige skorper, mest fremtrædende på begge sider af halsen
Hæmatologiske og klinisk-kemiske fund er vist i tabel 2. De unormale fund omfattede polycytæmi (kalv 1, 2 og 3), leukocytose (kalv 1 og 3), hyperproteinæmi (kalv 1, 2 og 3), hypalbuminæmi (kalv 1, 2 og 3), hypokalcæmi (kalv 1 og 3) samt marginal hypokalæmi (kalv 1, 2 og 3). Kobberkoncentrationen og glutathionperoxidaseaktiviteten lå inden for de respektive referenceintervaller. Derimod lå jern- (kalv 1 og 3) og zinkkoncentrationerne (kalv 3) under de respektive referenceintervaller. C-vitaminkoncentrationen var inden for normalområdet hos begge undersøgte kalve (kalv 2, 9,2 mg/L; kalv 3, 7,6 mg/L; referenceinterval Labor Limbach, Heidelberg, 2-20 mg/L).
Histologiske fund
I prøver af den angrebne hud var der lamellær ortokeratotisk hyperkeratose af epidermis med keratinflager og få overfladiske skorpedannelser. I dermis var hårfolliklerne små, og de follikulære lumina indeholdt kun få hårsække. Endvidere blev der dokumenteret minimal perivaskulær overfladisk lymfocytær infiltration/inflammation. Der var ingen tegn på relevant bakterie- eller svampeinfektion, parasitangreb eller autoimmun lidelse (fig. 2).
Kalv 1 hudhistologi på præsentationsdagen: Overfladisk laminær ortokeratotisk hyperkeratose svarende til det kliniske billede (flager). Hårfollikler er diffust reduceret i størrelse (stjerner). Note: Normal apokrin kirteludvidelse (#) i kvæghud
Behandling og klinisk forløb
To kalve (kalv 1 og 2) modtog ingen behandling i hele indlæggelsestiden. De blev tilbudt 3 liter en kommerciel mælkeerstatning to gange dagligt og fik hø og kalvestartfoder (korn) efter frit valg. Begge kalve drak godt og begyndte at spise med god appetit i løbet af de følgende dage. Der blev konstateret ny hårvækst og en reduktion af skældannelse fra en alder af 7 uger hos begge kalve (henholdsvis 1 og 3 uger efter ankomsten til klinikken). Det oprindeligt tynde hår var vokset fuldt ud igen, da kalvene blev udskrevet i en alder af 14 (kalv 2) og 18 (kalv 1) uger. På dette tidspunkt kunne man let skelne den genvoksede mørke hårpels fra den lidt lysere oprindelige, intakte hårpels. Et kontrolbesøg 9 måneder efter udskrivelsen viste en normal hårpels, og der var ikke observeret episoder af hårtab.
Kalv 3 blev diagnosticeret med en septisk arthritis i venstre tarsalled. Den indledende behandling bestod af cefquinome (1 mg/kg BM; s.c.; Cobactan 2,5 % ad us. vet.; MSD Animal Health Innovation GmbH, Schwabenheim, Tyskland) og meloxicam (0,5 mg/kg BM; s. c.; Metacam 20 mg/ml ad us. vet.; Boehringer Ingelheim GmbH, Ingelheim, Tyskland). Fem dage efter indlæggelsen blev der foretaget en artrotomi. Efter en midlertidig forbedring forværredes haltheden og dyrets generelle tilstand, og dyret blev aflivet 12 dage efter det kirurgiske indgreb. Der var indtil da kun blevet observeret skældannelse i hoved- og halsområdet. Figur 3 viser det kliniske forløb af ændringerne i hud og hårpels hos de tre kalve.
Klinisk forløb af ændringer i hud og hårpels i forskellige kropsregioner hos tre belgisk blå krydsningskalve, der blev henvist til klinikken i en periode på tre måneder. Den første række angiver ændringer i huden (dvs. skældannelse); den anden række viser tilstedeværelse eller fravær af hårtab og ny hårvækst
Herdundersøgelse
Efter samråd med mælkeproducenten og besætningsdyrlægen blev der aftalt et besætningsbesøg. Bedriften var beliggende i Sydtyskland i nærheden af to andre bedrifter på toppen af en bakke (~ 800 m over havets overflade). På tidspunktet for besøget bestod besætningen af 27 køer (20 BS, 3 RH, 3 HF, 1 BS x HF), fem kvier (BS) og syv kalve. Det rullende besætningsgennemsnit for det foregående år var på 6551 kg/ko/år. Alle voksne dyr var opstaldet i samme bindestald med madrasser og halmstrøelse.
Fodring og forvaltning
Rationen til de lakterende dyr bestod af græsensilage, hø og to forskellige kraftfodertyper i henhold til den anslåede aktuelle mælkeydelse (en eller flere skovle fulde). Den kemiske analyse af græsensilage, hø og majspellets blev foretaget på instituttet for fysiologi, fysiologisk kemi og dyreernæring (LMU München). Resultaterne pr. kg tørstof er anført i supplerende fil 2, og et uddrag af den computerstøttede beregning af rationen til lakterende køer er vist i supplerende fil 3. Da ejeren ikke havde adgang til en vægt, kunne rationen kun estimeres, og den blev fastsat til 20 kg græsensilage og 3 kg hø (vådvægt). For en ko i den højeste laktationsperiode vurderede ejeren, at mængden af kraftfoder, der blev givet, var ca. 5 kg (3 kg kornblanding, 2 kg pellets). Da fodringen med mineralblanding i bedste fald blev anset for at være sporadisk, blev den ikke medtaget i beregningen. Den anslåede ration indeholdt 22 % råfibre (14 % struktureret) og 10 % råprotein. Der blev konstateret et overskud af fibre (græsensilage med et meget højt tørstofindhold) og en mangel på protein (negativ kvælstofbalance i vommen). Ifølge modelberegningerne fik en ko i den højeste laktationsperiode nok foder til at producere 23,2 kg mælk.
Tørre køer og kvier fik kun græsensilage og hø. Mineralfoder blev givet sporadisk (hver 4-7 dag) til de lakterende dyr og til tider også til de tørre dyr. Alle køer havde adgang til græs i sommermånederne. Alle bedrifter i nærheden fik vand fra den samme brønd. Der blev produceret hø og græsensilage på bedriften. Der blev spredt gødning på alle græsgange; der var ikke blevet anvendt anden gødning i de sidste 10 år. Salt blev ikke tilbudt som en del af rationen.
Kalve blev født i bindestaldsarealet. Efter at de var blevet fjernet fra dæmningen, blev de enten opstaldet i individuelle eller fælles boksstalde. Hver kalv fik colostrum og mælk fra sin respektive moder i de første 7 til 10 dage af livet, hvorefter de blev skiftet til en kommerciel mælkeerstatning . I de sidste måneder før undersøgelsen blev mælkeerstatningsproduktet skiftet til et andet mærke, men problemet var fortsat. Der fandtes ingen standardprocedurer for, hvordan mælkeerstatningsmidlet skulle blandes, med angivelse af mængde, blanding og fodringstemperatur. På forespørgsel oplyste ejeren, at han anslog mængden af mælkeerstatning, og at blandetemperaturen varierede mellem kold og håndvarm, afhængigt af om der var varmt vand til rådighed i stalden. Ejeren oplyste, at der var forekommet hårtab hos kalve, der udelukkende blev fodret med sødmælk, men der forelå ingen optegnelser, som kunne bruges til at gennemgå fodringsstyringen af de berørte kalve. I nogle måneder havde BB-krydsningskalve også fået tre doser på 10 ml af en vitaminblanding til oral indtagelse i de første tre dage af deres liv. I en alder af 6 uger blev kalvene tilbudt frit valg af hø, korn og vand. Kalvene blev fravænnet omkring 3 måneders alderen.
Undersøgelse af før-afvænnede kalve
Syv kalve blev undersøgt på tidspunktet for besætningsbesøget. Fire yngre kalve (tre BS, en BB x BS) mellem 1 og 10 dage gamle, samt tre ældre kalve (BB x HF, BB x RH, BB x BS) i alderen 6 til 9 uger. Alle krydsningskalve var hankalve; de tre kvindelige renracede BS-kalve var beregnet til at være erstatningskvier. De yngre kalve viste ingen abnormiteter ved den fysiske undersøgelse, bortset fra en kalv, der led af neonatal diarré og feber; der kunne ikke påvises nogen abnormiteter i hud og pels. De tre ældre kalve viste hårtab omkring hoved, hals, albuer, skuldre og ryg (fig. 4). Hos alle tre kalve var alopecia og skældannelse begyndt omkring 3 ugers alderen, og hårene begyndte at vokse igen i en alder af ca. 6 uger. Alle de ældre kalve var dårligt udviklede og havde en lav kropskondition sammenlignet med BB-kalve i samme alder. Yderligere fund omfattede en uregelmæssig arytmi ved auskultation af hjertet hos en ni uger gammel krydsningskalv. Hudtesten og øjenæblernes placering afslørede ingen klinisk påviselige tegn på dehydrering. Der blev taget blodprøver fra alle kalvene som beskrevet ovenfor. Alle fire BB-krydsningskalve havde forhøjede værdier for hæmatokrit (51-59 %; gennemsnit 54 %; referenceinterval Klinik for drøvtyggere, LMU München, 30-36 %) og erytrocyttælling (12,5-14,6 × 1012/L; gennemsnit 13,50 × 1012/L; referenceinterval Klinik for drøvtyggere, LMU München, 5-8 × 1012/L). Niveauerne af albumin og totalprotein var ikke tegn på dehydrering hos disse kalve . Hæmatologiske og biokemiske parametre samt niveauet af spormineraler og glutathionperoxidaseaktivitet var ikke bemærkelsesværdige med undtagelse af en reduceret koncentration af totalprotein hos en to dage gammel kalv havde (42.40 g/L; referenceinterval Klinik for drøvtyggere, LMU München, 55-70 g/L), hvilket indikerer manglende overførsel af passiv immunitet.
Fire belgisk blå krydsningskalve på gården opstaldet i boksbokse. Billeder taget under besætningsbesøget. a og b: BB x HF-krydset kalv, 6 uger gammel, med omfattende hårtab omkring nakken, brynet og omkring øjnene. b: omfattende skældannelse af huden ved nakken. c og d: Ni uger gammel BB x BS-krydsningskalv med omfattende alopeci og fin hårvækst, bemærk kropsholdningen med bagbenene samlet under maven. d: Hoved og ørebasis med let skældannelse og fin hårvækst. e og f: BB x HF-krydsningskalv på 9 uger med alopeci og fin hårvækst. f: Bryst og skulderparti med fin hårvækst. g: Nyfødt BB x BS-krydsningskalv med intakt hårpels
Undersøgelse af voksne dyr
Rumenfyldningen var god til meget god hos næsten alle voksne dyr. Fjorten ud af 27 voksne dyr udviste klodeformationer som følge af overvækst og manglende klovslibning, og fire ud af disse 14 udviste tegn på halthed eller decubital sår i ekstremiteterne. Body condition score (BCS) blev bestemt for alle voksne dyr i henhold til Edmonson et al. . Fire dyr i forskellige stadier af laktationen havde en BCS på ≤2,5/5.
Blodprøver fra seks nyligt friske køer blev analyseret, og resultaterne af hæmatologi og blodkemi viste ingen abnormiteter. Koncentrationen af beta-hydroxybutyrat var mellem 0,5 og 0,9 mmol/L for disse dyr. Seks urinprøver fra lakterende dyr blev undersøgt, og resultaterne var upåfaldende bortset fra fire prøver med lave natriumkoncentrationer (13,0-16,0 mmol/L; referencegrænse Klinik for drøvtyggere, LMU München, > 20 mmol/L).
Flere undersøgelser
Efter samråd med ejeren og besætningsdyrlægen blev yderligere fire BB-krydsningskalve mellem 1 og 8 dage gamle bragt til klinikken for at studere sygdommens kliniske forløb fra begyndelsen og fremefter. Alle kalvene havde modtaget colostrum fra deres respektive mødre og fik sødmælk, inden de blev hentet. For at reproducere situationen på bedriften fik alle fire kalve den samme kommercielle mælkeerstatning to gange dagligt. Vand, hø og kalvestartfoder (korn) blev tilbudt ad libitum. De fik ingen yderligere behandlinger. Alle kalvene blev klinisk undersøgt ved ankomsten, og der blev udtaget blodprøver til analyse som beskrevet ovenfor, herunder bestemmelse af C-vitaminindholdet i serum. Tilstedeværelsen eller fraværet af hårtab blev dokumenteret dagligt. Grundlæggende karakteristika og resultaterne af den kliniske undersøgelse er vist i tabel 1. De unormale fund var begrænset til en uregelmæssig hjerterytmeforstyrrelse hos tre kalve (kalv 4, 5 og 6). Tabel 2 viser resultaterne af hæmatologiske og klinisk-kemiske undersøgelser, herunder C-vitaminniveauet i serum. Ingen af de fire kalve udviklede de typiske læsioner, herunder skældannelse og hårtab, mens de var indlagt på klinikken i løbet af de følgende 3 måneder.