Alopecia in Belgian Blue crossbred calves: a case series

W grudniu 2010 roku do Kliniki Przeżuwaczy LMU w Monachium zgłosił się hodowca bydła mlecznego z problemem wypadania włosów u cieląt rasy BB. Według właściciela, w ciągu 5 lat problem dotyczył cieląt obu płci pochodzących od matek rasy mlecznej, spłodzonych przez różne buhaje rasy BB w drodze sztucznej inseminacji. Cielęta te urodziły się z normalną okrywą włosową. Począwszy od 2 do 3 tygodnia życia wykazywały złą kondycję, nadmierne łuszczenie się skóry na szyi i głowie z obszarami, które wkrótce potem stawały się łysiejące, zaczynając od głowy i postępując w kierunku grzbietowej linii środkowej, szyi i ramion. W wieku od 8 do 10 tygodni u wszystkich cieląt zaczęły odrastać włosy na dotkniętych obszarach. Lekarz weterynarii stada rozpoczął badanie tego problemu z powodu obaw właściciela związanych z finansami i dobrostanem zwierząt. Po przeprowadzeniu badania fizykalnego i pobraniu próbek uszkodzonej skóry, lekarz weterynarii nie był w stanie ustalić żadnej wyraźnej przyczyny u żadnego z dotkniętych cieląt. Świąd był nieobecny, nie znaleziono żadnych ektopasożytów, a zeskrobiny skóry nie dały żadnych nieprawidłowych wyników. Biopsje skóry uzyskane przez lekarza weterynarii nie były jednoznaczne w ustaleniu przyczyny łysienia. Leczenie chorych zwierząt środkami owadobójczymi w postaci aerozolu oraz preparatami witaminowymi w postaci iniekcji nie przyniosło poprawy stanu zdrowia. Zaskakujące było również to, że cielęta czystej krwi mlecznej w tym samym gospodarstwie podobno nigdy nie były dotknięte tą chorobą. Po konsultacji z lekarzem weterynarii stada, trzy zwierzęta z typowymi objawami zostały skierowane do kliniki w celu dalszej diagnostyki i zorganizowano wizytę w stadzie.

Według opinii właściciela, trzy skierowane cielęta płci męskiej, w wieku 19, 28 i 42 dni, prezentowały różne stadia tego samego schorzenia. Trafiły do kliniki w ciągu 3 miesięcy (styczeń-marzec 2011). Następujące postępowanie przy pielęgnacji cieląt było identyczne dla wszystkich cieląt: Po urodzeniu oddzielono je od matki i umieszczono w boksach pojedynczych ze słomianą ściółką. Przez pierwsze 7 do 10 dni życia otrzymywały dwa razy dziennie po 2 litry pełnego mleka od swojej matki. Następnie cielęta były karmione dwa razy dziennie 4 litrami komercyjnego preparatu mlekozastępczego. Do tego momentu nie podawano siana, soli, paszy mineralnej, ziarna ani wody. Podobnie jak wszystkie inne dotknięte chorobą cielęta, te trzy cielęta otrzymały po wystąpieniu objawów doustną mieszankę witaminową, jak również preparat przeciwpasożytniczy (Moxidectin Triclamox Rind Pour-on-Lösung ad us. vet.; moxidectin 0.5 mg/kg BM, triclabendazol 20 mg/kg BM), ale utrata włosów postępowała niezależnie od tego.

Badanie kliniczne przy przyjęciu, procedura pobierania próbek krwi i analiza

Natychmiast po przybyciu do kliniki przeprowadzono badanie kliniczne zgodnie z Dirksen i wsp. Krew pobierano od każdego zwierzęcia przez nakłucie żyły szyjnej i umieszczano bezpośrednio w probówkach typu S-Monovette (Sarstedt, Nümbrecht-Rommelsfeld, Niemcy) z antykoagulantem (K3 EDTA, 1,6 mg/ml; Sarstedt) i gazem krwi Monovette (50 IU/ml heparyny litowej zrównoważonej wapniem; Sarstedt). Próbki krwi były przetwarzane natychmiast, a surowica była zbierana przez wirowanie przy 3000 rpm przez 10 minut w temperaturze 25 ° C. Parametry serologiczne, jak również aktywność peroksydazy glutationowej w krwi pełnej, oznaczano przy użyciu automatycznego systemu analizującego (Automatic Analyser Hitachi 911; Roche Diagnostics, Indianapolis, IN). Analizy hematologiczne wykonano przy użyciu automatycznego analizatora hematologicznego (Sysmex F820; Sysmex, Norderstedt, Niemcy). Dodatkowo oznaczono stężenie molibdenu w surowicy w IDEXX VetMed Labor GmbH, Ludwigsburg, Niemcy. U dwóch cieląt (cielę 2 i 3) oznaczono poziom witaminy C w surowicy uzyskanej w dniu hospitalizacji przy użyciu chromatografii cieczowej ze spektrometrią mas (MVZ Labor Dr. Limbach, Heidelberg, Niemcy).

Ponadto pobrano w znieczuleniu miejscowym 8-mm biopsję skóry z trzech różnych miejsc (jedno miejsce nieuszkodzone, dwa miejsca dotknięte chorobą), natychmiast utrwalono w 10% obojętnym buforowanym formaldehydzie i wysłano do Instytutu Patologii Weterynaryjnej LMU Monachium w celu zbadania. Utrwalone w formalinie próbki były rutynowo zatapiane w parafinie i przetwarzane do badania histologicznego oraz barwione hematoksyliną i eozyną (HE) i Giemsą.

Objawy kliniczne i patologia kliniczna

Tabela 1 przedstawia charakterystykę wyjściową i wyniki badania klinicznego trzech cieląt w czasie hospitalizacji. Nieprawidłowe wyniki kliniczne obejmowały następujące cechy: nieprawidłowa postawa z tylnymi kończynami zebranymi pod brzuchem (cielęta 1 i 2), podczas gdy cielę 3 nie dźwigało ciężaru na lewej tylnej kończynie. Cielęta 1 i 2 miały zimne kończyny. U cieląt 1 i 3 udokumentowano nieznaczne zaczerwienienie dziąseł wokół siekaczy i łagodnie zwiększone różowe zabarwienie błon śluzowych. Osłuchiwanie serca wykazało nieregularną arytmię serca z brakiem szmeru lub rozszerzenia żył szyjnych (cielęta 1 i 2). U dwóch cieląt stwierdzono hipotermię (cielę 1, 35,9 °C; cielę 2, 37,6 °C), podczas gdy cielę 3 miało podwyższoną temperaturę ciała (40,2 °C). Podczas badania jamy ustnej i przestrzeni międzypalcowych nie stwierdzono żadnych owrzodzeń. Stan nawodnienia był prawidłowy, co określono na podstawie oceny namiotu skórnego i pozycji gałek ocznych. U dwóch cieląt (cielęta 1 i 2), łysienie było obecne wzdłuż grzbietu, po obu stronach szyi, na czole, wokół podstawy obu uszu, obu policzków i wokół oczu. Zaczerwieniona skóra w tych miejscach była częściowo pokryta grubymi skorupami, które można było łatwo usunąć. Skóra dotkniętych obszarów była sucha i tylko lekko zaogniona, nie stwierdzono żadnych nadżerek (Rys. 1). W przeciwieństwie do tego cielę 3 wykazywało tylko lekkie łuszczenie się skóry na różnych częściach głowy i szyi.

Wyniki badań hematologicznych i chemii klinicznej przedstawiono w tabeli 2. Nieprawidłowe wyniki badań obejmowały policytemię (cielęta 1, 2 i 3), leukocytozę (cielęta 1 i 3), hiperproteinemię (cielęta 1, 2 i 3), hipalbuminemię (cielęta 1, 2 i 3), hipokalcemię (cielęta 1 i 3), jak również marginalną hipokaliemię (cielęta 1, 2 i 3). Stężenie miedzi i aktywność peroksydazy glutationowej mieściły się w odpowiednich przedziałach referencyjnych. Natomiast stężenia żelaza (cielęta 1 i 3) i cynku (cielę 3) były poniżej odpowiednich przedziałów referencyjnych. Stężenie witaminy C było w normalnym zakresie u obu badanych cieląt (cielę 2, 9,2 mg/L; cielę 3, 7,6 mg/L; przedział referencyjny Labor Limbach, Heidelberg, 2-20 mg/L).

Wyniki badań histologicznych

W próbkach skóry dotkniętej chorobą występowała płytkowa ortokeratotyczna hiperkeratoza naskórka z płatkami keratyny i nielicznymi powierzchownymi skorupami. W skórze właściwej mieszki włosowe były małe, a światło mieszków zawierało tylko kilka trzonów włosowych. Ponadto udokumentowano minimalny okołonaczyniowy powierzchowny naciek limfocytarny/zapalenie. Nie było dowodów na istotne zakażenie bakteryjne lub grzybicze, infestację pasożytniczą lub zaburzenia autoimmunologiczne (Ryc. 2).

Leczenie i przebieg kliniczny

Dwa cielęta (cielęta 1 i 2) nie były leczone przez cały okres hospitalizacji. Podawano im 3 litry komercyjnego preparatu mlekozastępczego dwa razy dziennie i otrzymywały siano oraz starter dla cieląt (ziarno) do wyboru. Oba cielęta dobrze piły i w ciągu następnych dni zaczęły jeść z dobrym apetytem. W wieku 7 tygodni u obu cieląt (odpowiednio 1 i 3 tygodnie po przybyciu do kliniki) stwierdzono nowy wzrost włosów i zmniejszenie łuski. Przy wypisie w wieku 14 (cielę 2) i 18 (cielę 1) tygodni początkowo cienkie włosy całkowicie odrosły. W tym czasie można było łatwo odróżnić odrastającą ciemną okrywę włosową od nieco jaśniejszej pierwotnej, nienaruszonej okrywy włosowej. Wizyta kontrolna 9 miesięcy po wypisie wykazała normalną okrywę włosową i nie zaobserwowano epizodów wypadania włosów.

U cielęcia 3 rozpoznano septyczne zapalenie stawu stępu lewego. W leczeniu początkowym zastosowano cefquinome (1 mg/kg BM; s.c.; Cobactan 2,5% ad us. vet.; MSD Animal Health Innovation GmbH, Schwabenheim, Niemcy) oraz meloxicam (0,5 mg/kg BM; s.c.; Metacam 20 mg/ml ad us. vet.; Boehringer Ingelheim GmbH, Ingelheim, Niemcy). Pięć dni po przyjęciu wykonano artrotomię. Po przejściowej poprawie kulawizna i stan ogólny zwierzęcia pogorszyły się i 12 dni po interwencji chirurgicznej zwierzę zostało poddane eutanazji. Do tego momentu obserwowano jedynie łuszczenie się skóry w okolicy głowy i szyi. Ryc. 3 przedstawia przebieg kliniczny zmian skóry i okrywy włosowej trzech cieląt.

Badanie stad

Po konsultacji z hodowcą bydła mlecznego i lekarzem weterynarii stada, zorganizowano wizytę w stadzie. Gospodarstwo znajdowało się w południowych Niemczech w sąsiedztwie dwóch innych gospodarstw na szczycie wzgórza (~ 800 m nad poziomem morza). W czasie wizytacji stado liczyło 27 krów (20 BS, 3 RH, 3 HF, 1 BS x HF), pięć jałówek (BS) i siedem cieląt. Średnia krocząca stada za poprzedni rok wynosiła 6551 kg/krowę/rok. Wszystkie dorosłe zwierzęta były trzymane w tej samej oborze uwiązowej z materacami i ściółką ze słomy.

Pokarm i zarządzanie

Pasza dla zwierząt w laktacji składała się z kiszonki z trawy, siana i dwóch różnych pasz treściwych w zależności od szacowanej aktualnej wydajności mleka (jedna lub kilka pełnych szufli). Analiza chemiczna kiszonki z traw, siana i granulatu kukurydzianego została przeprowadzona w Instytucie Fizjologii, Chemii Fizjologicznej i Żywienia Zwierząt (LMU Monachium). Wyniki w przeliczeniu na kg suchej masy podano w pliku dodatkowym 2, a fragment wspomaganego komputerowo wyliczenia dawki pokarmowej dla krów w okresie laktacji przedstawiono w pliku dodatkowym 3. Ponieważ właściciel nie miał dostępu do wagi, dawka pokarmowa mogła być jedynie oszacowana i została określona na 20 kg kiszonki z traw i 3 kg siana (wagi mokre). Dla krowy w szczycie laktacji właściciel ocenił ilość podawanej paszy treściwej na około 5 kg (3 kg mieszanki zbożowej, 2 kg granulatu). Ponieważ żywienie mieszanką mineralną uznano za sporadyczne, nie uwzględniono jej w obliczeniach. Oszacowana dawka pokarmowa zawierała 22% włókna surowego (14% strukturalnego) i 10% białka surowego. Uwidoczniła się nadmierna podaż włókna (kiszonka z traw o bardzo wysokiej zawartości suchej masy) i niedobór białka (ujemny bilans azotu w żwaczu). Według szacunków modelowych krowa w szczycie laktacji otrzymywała ilość paszy wystarczającą do wyprodukowania 23,2 kg mleka.

Krowy suche i jałówki otrzymywały tylko kiszonkę z traw i siano. Pasza mineralna była podawana sporadycznie (co 4-7 dni) zwierzętom w laktacji, a czasami także zwierzętom zasuszonym. W miesiącach letnich wszystkie krowy miały dostęp do pastwiska. Wszystkie gospodarstwa w okolicy zaopatrywane były w wodę z tej samej studni. W gospodarstwie produkowano siano i kiszonki z traw. Obornik był rozrzucany na wszystkich pastwiskach; w ciągu ostatnich 10 lat nie stosowano żadnych innych nawozów. Sól nie była oferowana jako część racji żywieniowej.

Cielęta rodziły się w oborze. Po odłączeniu od matki, były trzymane w indywidualnych lub wspólnych boksach. Każde cielę otrzymywało siarę i mleko od swojej matki przez pierwsze 7 do 10 dni życia, po czym przestawiono je na komercyjny preparat mlekozastępczy. W ostatnich miesiącach przed badaniem zmieniono preparat mlekozastępczy na inną markę, ale problem nadal występował. Nie była dostępna żadna standardowa procedura operacyjna dotycząca sposobu mieszania preparatu mlekozastępczego, określająca ilość, sposób mieszania i temperaturę karmienia. Na żądanie właściciel stwierdził, że oszacował ilość preparatu mlekozastępczego i że temperatura mieszania wahała się od zimnej do ciepłej w zależności od dostępności ciepłej wody w oborze. Właściciel stwierdził, że u cieląt karmionych wyłącznie mlekiem pełnym wystąpiło wypadanie włosów, ale nie były dostępne żadne zapisy pozwalające na dokonanie przeglądu sposobu żywienia dotkniętych tym problemem cieląt. Od kilku miesięcy cielęta rasy BB otrzymywały również trzy 10 ml dawki doustnej mieszanki witaminowej przez pierwsze 3 dni życia. W wieku 6 tygodni cielętom oferowano siano, ziarno i wodę. Cielęta zostały odsadzone w wieku około 3 miesięcy.

Badanie cieląt przed odsadzeniem

W czasie wizyty w stadzie przebadano siedem cieląt. Cztery młodsze cielęta (trzy BS, jedno BB x BS) w wieku od 1 do 10 dni, a także trzy starsze (BB x HF, BB x RH, BB x BS) w wieku od 6 do 9 tygodni. Wszystkie cielęta krzyżówki były płci męskiej, trzy żeńskie cielęta czystej krwi BS były przeznaczone na jałówki zastępcze. Młodsze cielęta nie wykazywały żadnych nieprawidłowości w badaniu fizykalnym, z wyjątkiem jednego cielęcia cierpiącego na biegunkę noworodkową i gorączkę; nie stwierdzono żadnych nieprawidłowości w wyglądzie skóry i sierści. U trzech starszych cieląt stwierdzono wypadanie włosów na głowie, szyi, łokciach, ramionach i grzbiecie (Rys. 4). U wszystkich trzech cieląt łysienie i łuszczenie rozpoczęło się około 3 tygodnia życia, a włosy zaczęły odrastać w wieku około 6 tygodni. Wszystkie starsze cielęta były słabo rozwinięte i wykazywały niską kondycję ciała w porównaniu z cielętami BB w tym samym wieku. U dziewięciotygodniowego cielęcia mieszańca stwierdzono nieregularną arytmię przy osłuchiwaniu serca. Naciąganie skóry i pozycja gałek ocznych nie wykazały klinicznie uchwytnych oznak odwodnienia. Próbki krwi zostały pobrane od wszystkich cieląt w sposób opisany powyżej. Wszystkie cztery cielęta rasy BB miały podwyższone wartości hematokrytu (51-59%; średnia, 54%; przedział referencyjny Clinic for Ruminants, LMU Munich, 30-36%) i liczby erytrocytów (12,5-14,6 × 1012/L; średnia, 13,50 × 1012/L; przedział referencyjny Clinic for Ruminants, LMU Munich, 5-8 × 1012/L). Poziomy albumin i białka całkowitego nie wskazywały na odwodnienie u tych cieląt. Parametry hematologiczne i biochemiczne, jak również poziom minerałów śladowych i aktywność peroksydazy glutationowej były bez zmian, z wyjątkiem obniżonego stężenia białka całkowitego u dwudniowego cielęcia miał (42.40 g/L; przedział referencyjny Clinic for Ruminants, LMU Munich, 55-70 g/L), co wskazuje na niepowodzenie transferu odporności biernej.

Badanie zwierząt dorosłych

Wypełnienie gruczołu mlekowego było dobre do bardzo dobrego u prawie wszystkich dorosłych zwierząt. Czternaście z 27 dorosłych zwierząt wykazywało deformacje pazurów z powodu przerostu i braku przycinania pazurów, a cztery z tych 14 wykazywały objawy kulawizny lub odleżyn na kończynach. Ocena kondycji ciała (BCS) została określona dla wszystkich dorosłych zwierząt według Edmonsona i wsp. Cztery zwierzęta w różnych stadiach laktacji miały BCS ≤2,5/5.

Zanalizowano próbki krwi pobrane od sześciu świeżych krów, a wyniki badań hematologicznych i chemii krwi nie wykazały żadnych nieprawidłowości. Stężenie beta-hydroksymaślanu wynosiło u tych zwierząt od 0,5 do 0,9 mmol/l. Sześć próbek moczu zwierząt w okresie laktacji zostało przebadanych, a wyniki nie odbiegały od normy, poza czterema próbkami z niskim stężeniem sodu (13,0-16,0 mmol/L; granica referencyjna Clinic for Ruminants, LMU Munich, > 20 mmol/L).

Dalsze badania

Po konsultacji z właścicielem i lekarzem weterynarii stada, kolejne cztery cielęta krzyżówki BB w wieku od 1 do 8 dni życia zostały przywiezione do kliniki w celu zbadania przebiegu klinicznego choroby od początku. Wszystkie cielęta otrzymały siarę od swoich matek i przed pobraniem otrzymały mleko pełne. W celu odtworzenia sytuacji w gospodarstwie, wszystkie cztery cielęta otrzymywały dwa razy dziennie ten sam komercyjny preparat mlekozastępczy. Woda, siano i starter dla cieląt (ziarno) były podawane ad libitum. Nie stosowano wobec nich żadnych innych zabiegów. Wszystkie cielęta zostały zbadane klinicznie po przybyciu do gospodarstwa, a próbki krwi zostały pobrane do analizy, jak opisano powyżej, łącznie z oznaczeniem zawartości witaminy C w surowicy. Obecność lub brak wypadania włosów była dokumentowana codziennie. Charakterystyka wyjściowa i wyniki badania klinicznego są przedstawione w tabeli 1. Nieprawidłowości były ograniczone do nieregularnej arytmii serca u trzech cieląt (cielęta 4, 5 i 6). Tabela 2 przedstawia wyniki badań hematologicznych i chemii klinicznej, w tym poziom witaminy C w surowicy. U żadnego z czterech cieląt podczas hospitalizacji w klinice w ciągu następnych 3 miesięcy nie wystąpiły typowe zmiany chorobowe, w tym łuszczenie się skóry i wypadanie włosów.