Regular ArticleCytokines and Inflammation

Virtually all of the cytokines mediate biological activities either directly on immune cells or upon the adhesion molecules with which immune cells interact and may therefore be considered pro-inflammatory. Diverse citochine, tra cui il fattore di necrosi tumorale (TNF), l’interleuchina (IL)-1, IL-6 e i membri della famiglia delle piccole citochine, sono unicamente in grado di promuovere l’infiltrato cellulare e i danni ai tessuti residenti che sono caratteristici dell’infiammazione. Vengono descritte la biologia e le tecniche per il dosaggio di queste citochine. I biotest hanno fornito i primi metodi disponibili per caratterizzare le citochine. Anche se potenzialmente più sensibile dei saggi basati sul sistema immunitario, i biotest possono non essere in grado di distinguere tra le citochine con attività a reazione incrociata. Inoltre, i biotest possono essere falsamente negativi di fronte a inibitori, Resta utile, tuttavia, per testare le citochine dalla loro attività biologica. Gli ELISA non differenzieranno le forme biologicamente attive da quelle inattive ma immunoreattive delle proteine. Poiché i biotest rileveranno solo l’attività funzionale, possono essere utili per identificare gli antagonisti delle citochine in una miscela di reazione. La clonazione molecolare dei cDNA delle citochine e lo sviluppo di metodi di espressione su larga scala hanno reso disponibili quantità virtualmente illimitate di proteine per saggi biologici. Le proteine purificate sono state utilizzate anche per sviluppare tecniche di dosaggio basate sul sistema immunitario come gli ELISA per quantificare le citochine. Gli ELISA forniscono il migliore e in molti casi l’unico meccanismo per distinguere le citochine con significative attività biologiche sovrapposte. L’isolamento di cDNA citochine-specifici permette l’uso di tecniche molecolari per identificare trascrizioni di mRNA citochine-specifiche. Una tecnica estremamente sensibile per rilevare i trascritti è la reazione a catena della polimerasi basata sull’RNA (RT-PCR). I test biologici per IL-1, IL-6, IL-8 e TNF sono ben standardizzati e sono descritti qui. Sono anche descritte le tecniche generali per l’ELISA e la RT-PCR.

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