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- Introduzione
- Definizione dei rifiuti a rischio biologico generati in laboratorio
- Metodi di raccolta dei rifiuti a rischio biologico
- Scarpe
- Laboratorio di ricerca/ pipettaggio clinico
- Inside the Biological Safety Cabinet
- Solidi contaminati
- Liquidi
- Impostazione corretta del pallone di aspirazione a vuoto
- Drosophila
- Carcasse di animali contaminati, parti del corpo e lettiere
- Tessuti umani/Parti del corpo
- Carico e scarico dell’autoclave in sicurezza
- Precauzioni per l’autoclavaggio
- Formazione
- Procedimenti di decontaminazione dei rifiuti in autoclave
- Test e verifica del ciclo di decontaminazione dei rifiuti in autoclave
- Manutenzione preventiva dell’autoclave
Introduzione
La politica di smaltimento dei rifiuti biologici dell’UNC-CH stabilisce procedure adeguate per la raccolta, la decontaminazione e lo smaltimento dei rifiuti a rischio biologico generati in laboratorio. Questa politica è stata sviluppata al fine di ridurre al minimo il rischio di esposizione per coloro che possono entrare in contatto con i rifiuti a rischio biologico generati in un laboratorio di ricerca UNC-CH, in particolare:
- lavoratori di laboratorio che generano e raccolgono rifiuti a rischio biologico durante la ricerca,
- personale di supporto che recupera, trasferisce e sterilizza in autoclave i rifiuti a rischio biologico,
- personale di pulizia responsabile del trasporto dei rifiuti autoclavati negli edifici che ospitano laboratori di ricerca UNC-CH,
- personale delle strutture (idraulici, elettricisti, HVAC, saldatori, ecc.), il personale di emergenza e i visitatori occasionali del laboratorio,
- e i dipendenti responsabili della rimozione dei rifiuti generati nei laboratori di ricerca UNC-CH.
Le regole sui rifiuti medici del North Carolina (15A NCAC 13 B .1200), richiedono che i “rifiuti medici regolamentati”, definiti come “sangue e fluidi corporei in contenitori individuali superiori a 20 ml, rifiuti microbiologici e patologici”, devono essere trattati prima dello smaltimento per renderli non pericolosi. La maggior parte dei rifiuti biohazard generati dai laboratori del campus UNC-CH, come definito di seguito, rientra nella categoria definita dallo Stato di “rifiuti microbiologici” all’interno del 15A NCAC 13 B .1200. I rifiuti a rischio biologico generati e raccolti nei laboratori di ricerca UNC-CH devono essere adeguatamente sterilizzati in autoclave secondo le procedure descritte di seguito. Questo processo cambia le caratteristiche biologiche dei rifiuti, riducendo o eliminando così il loro potenziale di causare malattie. I laboratori con rifiuti a rischio biologico non specificatamente trattati da questo documento (come i rifiuti con rischi multipli, ad esempio i rifiuti radioattivi a rischio biologico) dovrebbero consultare l’ufficio Ambiente, Salute e Sicurezza per metodi alternativi di trattamento e smaltimento.
Le procedure di questa politica sono coerenti con le sezioni applicabili dell’OSHA Bloodborne Pathogens Standard 29 CFR 1910.1030.
Definizione dei rifiuti a rischio biologico generati in laboratorio
Tutti i rifiuti a rischio biologico generati nei laboratori di ricerca UNC-CH saranno adeguatamente trattati prima del loro trasferimento e dell’interramento finale in discarica o incenerimento. Questi rifiuti a rischio biologico includono:
- Materiali contaminati o potenzialmente contaminati durante la manipolazione o la pulizia del materiale generato durante le attività di ricerca e/o insegnamento che richiedono il livello di biosicurezza 1, 2, o 3 o il livello di biosicurezza animale o vegetale 1, 2, o 3. Fai riferimento alla sezione della registrazione dei rischi biologici del tuo laboratorio nel piano di sicurezza del laboratorio (Allegato F) per identificare questi materiali nel tuo laboratorio.
- Sangue liquido umano e fluidi corporei.
- Tessuti umani e resti anatomici.
- Materiali contaminati con tessuti umani o colture di tessuti (primari e stabiliti) perché questi sono gestiti a BSL-2.
- Carcasse di animali, parti del corpo, sangue, fluidi e lettiere di animali infettati con agenti BSL2 e BSL3.
Sangue e fluidi corporei (rifiuti medici regolamentati) | Trattati con candeggina o in autoclave e messi nella fogna sanitaria. |
Rifiuti microbiologici compresi organismi di livello di biosicurezza 1, 2 e 3: (Rifiuti medici regolamentati) | Autoclavati a 121°C. (Le autoclavi sono testate settimanalmente usando bioindicatori Geobacillus stearothermophilus) o trattati chimicamente e messi nella fogna sanitaria.Nota: Le regole NC sui rifiuti medici non permettono la disinfezione chimica dei liquidi regolamentati seguita dallo smaltimento nella fogna sanitaria a meno che non sia stata ottenuta l’approvazione dalla NC Division of Waste Management. |
Rifiuti patologici (carcasse di animali infettati da esseri umani BSL1 e BSL2 questo include topi transgenici) (Rifiuti medici regolamentati) | Gli animali vengono inceneriti dal fornitore (Stericycle) |
Rifiuti patologici (carcasse di animali infettati da patogeni umani BSL3) (Rifiuti medici regolamentati) | Autoclavati in laboratorio a 121°C. (Le autoclavi sono testate settimanalmente utilizzando bioindicatori Geobacillus stearothermophilus). Dopo l’autoclavaggio gli animali vengono inceneriti dal fornitore (Stericycle) |
Rifiuti patologici (carcasse di animali utilizzati per test in vivo di prodotti farmaceutici) (Rifiuti medici regolamentati | Gli animali vengono inceneriti dal fornitore (Stericycle) |
Carcasse di animali non infetti | Gli animali vengono inceneriti dal fornitore (Stericycle) |
Non-Sharps | Contenitori bianchi di plastica per sharps inviati in discarica |
Biohazardous Sharps | Contenitori rossi di plastica per sharps sono autoclavati e poi inviati in discarica |
Riferimento al grafico sottostante per una panoramica dei quattro metodi più comuni di raccolta dei rifiuti biohazard. Questo grafico è disponibile anche a grandezza naturale. Questi metodi sono descritti più in dettaglio più in basso nella pagina. Per le carcasse di animali contaminati, le parti del corpo e le lettiere, fai riferimento a quella particolare sezione di questa guida per una guida allo smaltimento. I rifiuti a rischio biologico provenienti da aree di contenimento designate BSL-2 o superiori devono essere indicati nella sezione di registrazione dei rischi biologici del piano di sicurezza del laboratorio (Allegato F).
Metodi di raccolta dei rifiuti a rischio biologico
Scarpe
Includere elementi quali:
- lame di rasoio,
- bisturi,
- lancette,
- siringhe con/senza aghi,
- coperchi per vetrini, e
- provette per campioni
Nei laboratori di ricerca UNC-CH, gli sharps biohazardous sono raccolti direttamente in contenitori di plastica rossi, disponibili da FisherScientific (stock # 14830124 per contaminati, 1482664B per non contaminati). Questi contenitori devono recare il simbolo di rischio biologico marcato con una “x” utilizzando il nastro indicatore dell’autoclave. I regolamenti federali OSHA (CFR 1910.1030) richiedono che i laboratori a rischio biologico riducano al minimo l’uso di oggetti taglienti quando possibile e che gli aghi non siano reincappucciati, piegati di proposito, rotti o altrimenti manipolati a mano. Per evitare incidenti legati al riempimento eccessivo dei contenitori, rimuovere i contenitori per lo smaltimento quando sono pieni per 2/3. Quando si rimuove il contenitore di oggetti taglienti da un armadio di biosicurezza, decontaminare sempre l’esterno del contenitore. I contenitori di oggetti taglienti contaminati con materiali a rischio biologico dovrebbero essere sterilizzati in autoclave in un sacchetto arancione autoclavabile contrassegnato da una “x” sopra il simbolo di rischio biologico del sacchetto. Dopo l’autoclavaggio, i sacchetti con i contenitori di oggetti taglienti possono essere smaltiti con i normali rifiuti. Gli oggetti taglienti non pericolosi devono essere messi nei contenitori bianchi di plastica per oggetti taglienti. I contenitori per oggetti taglienti non pericolosi devono essere smaltiti nella normale spazzatura una volta che sono pieni per 2/3.
Mentre i piccoli frammenti di vetro rotto contaminato possono essere messi nei contenitori per oggetti taglienti identificati sopra, i grandi oggetti di vetro rotto contaminati devono essere sterilizzati in autoclave separatamente in un contenitore a pareti rigide (come una scatola di cartone) foderato con un sacchetto arancione per il rischio biologico che riporta una “x” come indicatore del nastro autoclave sul simbolo di rischio biologico del sacchetto. Metti il nastro adesivo sul sacchetto arancione prima che venga usato per foderare la scatola per evitare il contatto con materiali a rischio biologico e oggetti taglienti. Il simbolo universale di rischio biologico dovrebbe essere presente anche all’esterno della scatola. Dopo l’autoclavaggio, i rifiuti di vetro possono essere smaltiti nella normale spazzatura.
NON racchiudere le scatole di cartone usate per raccogliere sharps/vetro in un sacchetto per autoclave. Questo impedirà la penetrazione del vapore durante l’autoclave. La penetrazione del vapore è fondamentale durante il processo di decontaminazione. Ricordati di foderare le scatole con un sacchetto arancione per autoclave contrassegnato da una “x” sopra il simbolo di rischio biologico prima di foderare la scatola.
Laboratorio di ricerca/ pipettaggio clinico
Per la raccolta su larga scala al di fuori dell’armadio di biosicurezza di pipette di vetro (Pasteur) e di plastica contaminate secondo la definizione di rifiuti a rischio biologico, foderare un contenitore esterno resistente alla perforazione (come la scatola in cui sono arrivate le pipette) con un sacchetto arancione per autoclave contrassegnato da una “x” di nastro autoclave sensibile al calore (disponibile presso FisherScientific come numero di stock #15-903) sopra il simbolo di rischio biologico. Per evitare una possibile esposizione, posizionare il nastro indicatore “x” sopra il simbolo di rischio biologico del sacchetto prima di caricare il sacchetto con le pipette. Il simbolo universale di rischio biologico deve essere esposto anche sul contenitore esterno. Quando la scatola è piena, chiudere il sacchetto interno lasciando un’apertura per la penetrazione del vapore. Chiudere la scatola esterna con del nastro adesivo per autoclave. Non usare nastro colorato per chiudere la scatola.
Inside the Biological Safety Cabinet
Per la raccolta su piccola scala rimossa frequentemente, come il pipettaggio sterile in un armadio di sicurezza biologico, allineare un piccolo sacchetto arancione per autoclave all’interno di un contenitore di raccolta a parete rigida all’interno dell’armadio. Quando il sacchetto è pieno per i 2/3, chiuderlo debolmente, spruzzarlo con un disinfettante adeguato e trasferirlo in un contenitore di raccolta per pipette su scala più grande situato all’esterno dell’armadietto.Un’altra alternativa per la raccolta di pipette a rischio biologico è metterle in un lungo contenitore cilindrico a pareti dure riempito con un disinfettante efficace. Le pipette devono rimanere nel disinfettante per il tempo di contatto raccomandato per assicurare la decontaminazione.Sul banco, i puntali delle pipette devono essere raccolti in un piccolo sacchetto per autoclave che riveste un supporto in filo metallico o un altro contenitore con il simbolo di rischio biologico. Quando 2/3 pieno, chiudere liberamente il sacchetto per consentire la penetrazione del vapore, spruzzare con disinfettante e posizionare con altri rifiuti solidi a rischio biologico.
Solidi contaminati
I solidi a rischio biologico consistono in:
- piastre di coltura, matracci
- piastre di Petri
- rifiuti solidi di colture/scorte provenienti dalla sperimentazione e produzione di prodotti biologici
- guanti, camici, maschere
- altro materiale solido potenzialmente contaminato secondo la definizione di rifiuti a rischio biologico (sopra)
Il contenitore esterno di raccolta deve essere resistente, a prova di perdite, avere un coperchio ed essere di un design tale da non essere scambiato dal personale addetto alle pulizie per normale spazzatura. Questo contenitore deve essere etichettato con un adesivo di rischio biologico. Le gabbie metalliche non possono essere usate come contenitore esterno.
In aggiunta ai requisiti che i contenitori per i rifiuti a rischio biologico devono essere durevoli, a prova di perdite, avere un coperchio ed essere chiaramente etichettati, tutti i laboratori UNC sono tenuti a raccogliere i rifiuti a rischio biologico in contenitori esterni che siano rossi. Questa politica pone anche un limite massimo alle dimensioni di un contenitore per rifiuti biohazard a 15 galloni (57L). I sacchetti per il rischio biologico devono essere di colore arancione. Fisher Scientific offre sacchetti per autoclave arancioni di varie dimensioni; contatta il rappresentante del campus o per ulteriori dettagli.
Il contenitore rosso per il rischio biologico deve essere rivestito con un sacchetto arancione in polipropilene autoclavabile per il rischio biologico. Prima di rivestire il contenitore con il sacchetto arancione per il rischio biologico, incrociare il simbolo e/o le marcature del sacchetto per il rischio biologico con nastro adesivo per autoclave sensibile al calore (disponibile presso FisherScientific
come numero di stock 15-903). Il coperchio deve essere tenuto sul contenitore per il rischio biologico quando non è in uso. Rimuovere i sacchetti a 2/3 del loro volume. Non mettere mai vetro o oggetti taglienti in questi contenitori.
Liquidi
Anche se le regole e le definizioni per i rifiuti liquidi a rischio biologico variano un po’ dalle procedure per i rifiuti solidi, l’autoclave è il metodo di scelta per la disinfezione dei seguenti:
- Sangue animale/fluidi corporei di animali infettati con agenti BSL2 e BSL3.
- Cultura di tessuti umani, linee cellulari umane (primarie o consolidate)
- Fluidi corporei umani come definiti nel Piano di Controllo dell’Esposizione dei Laboratori UNC
- Mezzi di crescita liquidi rimossi dalle colture di tessuti umani
I rifiuti liquidi autoclavati possono essere scaricati direttamente nella fogna sanitaria.
La disinfezione chimica può essere un’alternativa accettabile all’autoclavaggio dei rifiuti liquidi a rischio biologico generati nei laboratori di ricerca dell’UNC-CH, come il trattamento con candeggina. Quando questo viene fatto, bisogna fare attenzione ad evitare spruzzi e gli scarichi devono essere lavati con quantità generose di acqua. Le regole sui rifiuti medici del NC non permettono la disinfezione chimica dei liquidi regolamentati seguita dallo smaltimento nella fogna sanitaria a meno che non sia stata ottenuta l’approvazione dalla Divisione NC di gestione dei rifiuti. I liquidi regolamentati includono i seguenti:
- Rifiuti liquidi di media da cellule/tessuti usati per la propagazione di agenti patogeni o tossine del gruppo di rischio 1, 2 o 3, compresi quelli prodotti in procedure di DNA ricombinante.
- “Rifiuti microbiologici” come definiti dalle norme sui rifiuti medici della Carolina del Nord: ad esempio colture e stock di agenti infettivi.
- da animali intenzionalmente infettati da microbi, vettori virali o tossine
Se si desidera ottenere l’approvazione per il trattamento chimico dei liquidi infettivi, è necessario fornire informazioni che dimostrino l’efficacia della sostanza chimica utilizzata per trattare gli agenti microbiologici specifici, tenendo conto di fattori quali temperatura, tempo di contatto, pH, concentrazione, penetrabilità e reattività del materiale organico. Tutte le richieste di approvazione devono essere presentate alla NC Division of Waste Management attraverso EHS, e documentate nel Lab Safety Plan sotto Schedule F (Biological Hazards). Visita la pagina EHS Chemical Treatment of Liquid Microbiological Waste per valutare se il trattamento chimico dei tuoi rifiuti liquidi a rischio biologico richiede l’approvazione.
Impostazione corretta del pallone di aspirazione a vuoto
- Bocchetta primaria – usata per raccogliere il liquido
- Bocchetta secondaria (pallone di troppo pieno) riduce al minimo gli schizzi
- Filtro in linea tra il pallone secondario e la fonte del vuoto (www.fishersci.com 09-744-75)
- Linea di vuoto che è occasionalmente servita dai lavoratori del laboratorio o dal personale di supporto UNC
I palloni primari e secondari dovrebbero contenere una soluzione di candeggina al 10%. La soluzione del pallone dovrebbe essere cambiata almeno una volta alla settimana per assicurare la forza di uccisione della soluzione di candeggina. La soluzione di scarto dei palloni può essere smaltita nello scarico del lavandino solo dopo che tutto il materiale potenzialmente infettivo ha avuto almeno 20 minuti di tempo di contatto.
NOTA: Se si usa un disinfettante diverso da una soluzione di candeggina, potrebbe non essere approvato per lo smaltimento nel lavandino e si dovrebbe contattare la Sezione Biosicurezza di EHS (919-962-5507).
Drosophila
Un’alternativa all’autoclavaggio della Drosophila è scaricare le mosche anestetizzate direttamente in un contenitore con una piccola quantità di olio minerale o una bottiglia contenente etanolo o isopropanolo. Se non hai intenzione di riutilizzare il materiale, queste bottiglie devono essere etichettate come rifiuti di etanolo, isopropanolo o olio minerale per essere ritirate da EHS. Se hai intenzione di riutilizzare il materiale in cui stai scaricando la Drosophila, allora etichetterai la bottiglia come etanolo riciclato, isopropanolo ecc. Queste bottiglie di prodotti chimici non possono essere versate nel lavandino o nella fogna sanitaria. Devono essere smaltiti utilizzando il programma online di raccolta dei rifiuti pericolosi attraverso EHS. Puoi trovare il modulo online.
Carcasse di animali contaminati, parti del corpo e lettiere
Le carcasse di animali vengono smaltite attraverso il Dipartimento di Medicina degli Animali da Laboratorio. Le carcasse di animali, le parti del corpo e le lettiere di animali inoculati con agenti infettivi vengono smaltiti tramite incenerimento. Questi materiali devono essere messi in scatole fornite dal DLAM e contrassegnati per l’incenerimento. (Nessun ago o altro tipo di metallo e nessuna plastica PVC devono essere messi nelle scatole di raccolta. Usare solo sacchetti di plastica non in PVC). Le carcasse contaminate da radioisotopi o agenti cancerogeni vengono raccolte dal Dipartimento per l’Ambiente, la Salute e la Sicurezza.
Tessuti umani/Parti del corpo
- I resti anatomici o tessuti umani riconoscibili e i tessuti di grandi dimensioni devono essere smaltiti tramite incenerimento. I resti contaminati con sostanze chimiche pericolose o radioattive richiedono uno smaltimento speciale e l’EHS deve essere contattato per lo smaltimento.
- I tessuti umani non riconoscibili possono essere sterilizzati in autoclave e smaltiti nella normale spazzatura. Se i tessuti sono stati conservati chimicamente, possono essere smaltiti come rifiuti chimici pericolosi.
Carico e scarico dell’autoclave in sicurezza
I materiali contaminati non devono mai essere lasciati nei corridoi o in altri spazi pubblici prima dell’autoclavaggio. I sacchi per il rischio biologico devono rimanere nel laboratorio finché non sono pronti per essere messi nell’autoclave. Non lasciare mai i sacchetti sul pavimento vicino all’autoclave. I sacchi chiusi e pronti per l’autoclave devono essere collocati in un contenitore secondario come indicato. Se i sacchi vengono trasportati all’autoclave, devono essere contenuti in contenitori secondari chiusi e con pareti rigide.
Minimizzare il più possibile il contatto con i rifiuti a rischio biologico. Non schiacciare o spingere mai verso il basso i rifiuti biohazard, i contenitori di rifiuti biohazard devono essere rimossi per l’autoclave quando sono pieni per 2/3. Il nastro indicatore dovrebbe essere applicato quando si posiziona il nuovo sacchetto dell’autoclave nel contenitore esterno a parete dura; questo ridurrà la manipolazione dei rifiuti biohazard durante la rimozione. Il nastro termosensibile per autoclave deve essere posizionato a forma di “X” sopra il simbolo di rischio biologico. Il nastro termosensibile deve essere del tipo che cambia colore, come quello su cui appaiono le strisce dopo il trattamento. Questo nastro è disponibile presso Fisher Scientific come # 15-903. Una volta che la disinfezione dell’autoclave è completa, la parte superiore dei sacchetti può essere sigillata strettamente con nastro da laboratorio.
Dopo aver seguito le fasi di decontaminazione dei rifiuti dell’autoclave come elencato di seguito, i rifiuti decontaminati vengono posti in un contenitore Rubbermaid Brute bianco da 44 galloni o 32 galloni (con un carrello per fusti), foderato con sacchetti di plastica nera, e situato nelle vicinanze dell’autoclave. Questi contenitori devono essere etichettati “AUTOCLAVED/ DECONTAMINATED WASTE ONLY” (etichette). I sacchetti per il rischio biologico collocati nei contenitori bianchi Brute e contrassegnati con il nastro termosensibile segnalano all’Housekeeping che i rifiuti sono sicuri e pronti per essere rimossi dal laboratorio per lo smaltimento nel cassonetto.
Ogni dipartimento è responsabile di fornire un numero adeguato di questi contenitori che sono disponibili presso la Fisher Scientific. Gli addetti alle pulizie non rimuoveranno o gestiranno in altro modo i rifiuti che traboccano o quelli contenuti in sacchetti per il rischio biologico non trattati.
Precauzioni per l’autoclavaggio
L’autoclavaggio, o sterilizzazione a vapore, è la procedura più affidabile per la distruzione di tutte le forme di vita microbica. La temperatura adeguata e il tempo di esposizione sono fattori critici per garantire l’affidabilità di questo metodo. Questi fattori critici dipendono dalla penetrazione del vapore in ogni parte del carico di rifiuti. Pertanto, l’utente dell’autoclave deve essere attento a prevenire l’intrappolamento dell’aria. Se non si permette a tutta l’aria di uscire dai rifiuti durante il ciclo, essa non può essere sostituita dal vapore. Il vapore saturo viene impiegato sotto pressione (almeno 15 libbre per pollice quadrato) per raggiungere una temperatura della camera di almeno 121 C (250 F) per un minimo di 15 minuti. Questo tempo viene misurato dopo che la temperatura del materiale saturo di vapore che viene sterilizzato raggiunge i 121 C.
I pericoli associati alle autoclavi includono calore estremo e alta pressione e grandi e pesanti porte e carrello di carico. Quando si utilizza un’autoclave si devono seguire le seguenti procedure di sicurezza:
- Conoscere il manuale del proprietario dell’autoclave. Anche se il principio è lo stesso per ogni autoclave, le raccomandazioni del produttore per l’uso possono variare ampiamente.
- Bloccare saldamente le porte e le guarnizioni dell’autoclave prima di far funzionare l’autoclave per prevenire un improvviso rilascio di vapore ad alta pressione. Alcune autoclavi non hanno interblocchi di sicurezza che impediscono all’autoclave di funzionare se la porta non è chiusa correttamente. Se la tua autoclave non ha interblocchi di sicurezza, dovrai prendere ulteriori precauzioni per assicurarti che le porte siano chiuse.
- Se hai una vecchia autoclave che ha poca o nessuna schermatura di calore intorno all’esterno, attacca cartelli che avvertono di “Superfici calde, tenere lontano” su o accanto all’autoclave per ricordare alle persone il pericolo. Non impilare o conservare materiali combustibili (cartone, plastica, liquidi volatili o infiammabili, bombole di gas compresso) vicino all’autoclave.
- Non autoclavare materiale tossico, volatile o radioattivo. Se si dispone di rifiuti a rischio biologico che contengono uno di questi materiali, si prega di contattare EHS per la guida.
- Quando un ciclo è completo, attendere circa 1-2 minuti dopo che il manometro legge zero prima di aprire lo sportello dell’autoclave.
- Aspettare almeno 30 secondi dopo l’apertura dello sportello prima di raggiungere o guardare nell’autoclave.
- Aprire lo sportello lentamente, tenendo la testa, il viso e le mani lontano dall’apertura.
- Lasciare raffreddare il contenuto prima di rimuoverlo dall’autoclave.
- Rimuovere le soluzioni dall’autoclave lentamente e delicatamente; alcune soluzioni possono ribollire se spostate o se esposte a temperatura ambiente. Guanti spessi e resistenti al calore, occhiali di sicurezza o schermo facciale e un grembiule di gomma devono essere indossati quando si rimuovono liquidi caldi dall’autoclave. I liquidi dovrebbero rimanere fermi per più di 1 ora prima di essere maneggiati senza guanti resistenti al calore.
- Pulire immediatamente qualsiasi fuoriuscita.
- Riportare immediatamente qualsiasi malfunzionamento o incidente al proprio supervisore.
Formazione
Tutti i dipendenti che utilizzano un’autoclave devono completare la formazione online sull’autoclave. Per assicurarsi che gli utenti meno abituali non trascurino le tecniche operative corrette, le istruzioni operative dell’autoclave dovrebbero essere affisse in prossimità dell’autoclave.
Procedimenti di decontaminazione dei rifiuti in autoclave
- L’autoclave deve essere azionata a 121°C (250°F) o superiore per un minimo di 60 minuti per la maggior parte dei rifiuti biohazard (vedi tabella sotto). Il tempo e la temperatura utilizzati per ogni tipo di rifiuto nel laboratorio devono essere convalidati utilizzando indicatori biologici per garantire una sterilizzazione efficace (vedi procedura di seguito). Alcune autoclavi sono attrezzate per funzionare a temperature più alte, che permetterebbero tempi di esposizione più brevi.
Materiale | Temperatura | Tempo |
---|---|---|
Vendita | 121°C (250°F) | 30 minuti |
Trash (sacchetti biohazard contenenti rifiuti infettivi) | 121°C (250°F) | 1 ora |
Glassware | 121°C (250°F) | 1 ora |
Liquidi | 121°C (250°F), ogni gallone | 1 ora |
Animali | 121°C (250°F) | 8 ore |
- Usare le impostazioni appropriate dell’autoclave. Le autoclavi possono avere impostazioni per “LIQUIDI” da usare per materiali liquidi. Le impostazioni “LIQUIDO” funzionano per periodi più lunghi a temperature più basse per minimizzare l’evaporazione del liquido e le fuoriuscite. Per i materiali solidi, l’impostazione “DRY GOODS WITH VACUUM” dovrebbe essere usata per i rifiuti infettivi in quanto è la più efficace per muovere il vapore e il calore nelle parti più profonde dei sacchi di grandi dimensioni producendo le migliori condizioni per uccidere gli organismi persistenti. “MERCI SECCHE SENZA VUOTO” dovrebbe essere usato solo per articoli puliti che devono essere sterilizzati. Le impostazioni di scarico dovrebbero anche essere appropriate al tipo di rifiuti da sterilizzare in autoclave. Lo scarico FAST dovrebbe essere usato per oggetti solidi e lo scarico SLOW dovrebbe essere usato per i liquidi.
- Rifiuti solidi. Non riempire troppo i sacchi dei rifiuti o l’autoclave. Questo interferirà con la penetrazione del vapore. Aggiungere circa 50-100 ml (~¼ a ½ tazza) di acqua ad ogni sacco di rifiuti solidi per facilitare la penetrazione del vapore nel sacco. Se c’è acqua naturale nel carico, l’aggiunta di acqua non è necessaria. Tenere i sacchi dei rifiuti leggermente aperti per permettere la penetrazione del vapore. I sacchi sono posti in vassoi di acciaio inossidabile o polipropilene prima della sterilizzazione in autoclave.
- Rifiuti liquidi. I liquidi dovrebbero essere messi in contenitori di borosilicato (Kimax o Pyrex) o di polipropilene per la sterilizzazione in autoclave. I contenitori non dovrebbero essere riempiti a più del 75% della capacità. I tappi dei contenitori devono essere allentati. Non autoclavare mai contenitori di liquido sigillati. Ciò potrebbe provocare un’esplosione di liquido surriscaldato. I contenitori di liquidi dovrebbero essere messi in un vassoio di acciaio inossidabile o polipropilene con ¼ o ½ pollice di acqua sul fondo del vassoio. Il vassoio dovrebbe essere posizionato su un ripiano nell’autoclave e non sul fondo della camera.
- Le regole sui rifiuti medici del N.C. affermano che le autoclavi devono essere dotate di un registratore grafico che registra accuratamente tempo e temperatura per ogni ciclo.
Test e verifica del ciclo di decontaminazione dei rifiuti in autoclave
- Le regole sui rifiuti medici della N.C. richiedono che le autoclavi siano monitorate settimanalmente in condizioni di pieno carico per l’efficacia attraverso l’uso di indicatori biologici. Gli indicatori geobacillus stearothermophilus devono essere usati con popolazioni medie di spore da 104 a 106 organismi. Ci sono molti indicatori biologici disponibili in commercio con una scelta di fiale di spore o strisce di spore con mezzi di crescita.
- Seguire le istruzioni fornite dal produttore degli indicatori biologici. La maggior parte richiede la refrigerazione quando viene conservata in magazzino.
- Posizionare l’indicatore al centro del sacchetto dei rifiuti o del materiale da sterilizzare in autoclave. È meglio mettere l’indicatore nel sacchetto dei rifiuti prima che sia riempito completamente. Per facilitare il recupero dell’indicatore dopo la sterilizzazione, attaccarlo con del nastro adesivo ad un foglio di carta dai colori vivaci o ad una lunga corda lasciata sporgere dal sacchetto. Gli indicatori possono anche essere messi in sacchetti di rifiuti di prova riempiti con materiali che simulano il pieno carico per il test.
- Autoclave i rifiuti seguendo le normali procedure. Una volta che il ciclo è completo e il contenuto si è raffreddato, rimuovere l’indicatore dai sacchetti di rifiuti indossando l’attrezzatura protettiva appropriata. Preparare e incubare l’indicatore e un indicatore di controllo che non è stato autoclavato come raccomandato dal produttore.
- Controllare i segni di crescita a intervalli regolari durante il periodo di incubazione (8, 12, 24 e 48 ore). Ci dovrebbero essere segni di crescita sull’indicatore di controllo che non è stato sterilizzato in autoclave o il test non è valido. Se ci sono segni di crescita sull’indicatore posto nei rifiuti, i rifiuti non sono stati sterilizzati correttamente. Il tempo, la temperatura e le procedure dell’autoclave dovrebbero essere rivalutate. Se si sospetta un problema all’autoclave, i Servizi delle strutture devono essere contattati immediatamente per la riparazione.
- Si dovrebbe tenere un registro di ogni test, che include il tipo di indicatore usato, la data, l’ora e il risultato del test. Un registro dei test dell’autoclave è disponibile per il download.
- I rifiuti non devono essere trattenuti fino a quando i risultati del test confermano l’efficacia. Se i risultati del test indicano che l’autoclave non sta sterilizzando correttamente, l’autoclave non deve essere usata per i rifiuti finché non è stata riparata. Il primo carico eseguito nell’autoclave dovrebbe essere testato con un indicatore biologico per assicurare il corretto funzionamento dell’autoclave.
Manutenzione preventiva dell’autoclave
Gli operatori dell’autoclave dovrebbero eseguire la seguente manutenzione preventiva sulla loro autoclave per mantenere l’efficacia delle autoclavi:
- Rimuovere lo schermo del tappo o il filtro di scarico per assicurarsi che sia privo di sporcizia, polvere o sedimenti che possono raccogliersi in esso e dovrebbe essere pulito come necessario.
- Pulire le superfici interne dai residui raccolti dal vapore o dai materiali da sterilizzare secondo necessità.
- Ispezionare visivamente le guarnizioni, le porte, i ripiani e le pareti per verificare l’accumulo di residui o l’usura regolarmente.
- Riportare qualsiasi problema con la vostra autoclave ai Servizi delle strutture.