Säännöllinen artikkeliSytokiinit ja tulehdus

Lähes kaikki sytokiinit välittävät biologisia toimintoja joko suoraan immuunisoluihin tai adheesiomolekyyleihin, joiden kanssa immuunisolut ovat vuorovaikutuksessa, ja niitä voidaan siksi pitää tulehdusta edistävinä. Useat sytokiinit, mukaan lukien tuumorinekroositekijä (TNF), interleukiini (IL)-1, IL-6 ja pienten sytokiinien perheen jäsenet, kykenevät ainutlaatuisella tavalla edistämään tulehdukselle ominaista soluvirtausta ja kudosvaurioita. Näiden sytokiinien biologiaa ja määritystekniikoita kuvataan. Biotestit olivat varhaisimmat käytettävissä olevat menetelmät sytokiinien karakterisoimiseksi. Vaikka bioanalyysit ovat mahdollisesti herkempiä kuin immuunijärjestelmään perustuvat määritykset, niillä ei välttämättä pystytä erottamaan toisistaan ristireagoivia sytokiineja. Lisäksi bioanalyysit voivat olla virheellisesti negatiivisia inhibiittoreiden vaikutuksesta. On kuitenkin edelleen hyödyllistä määrittää sytokiineja niiden biologisen aktiivisuuden perusteella. ELISA-testit eivät erota biologisesti aktiivisia proteiineja inaktiivisista mutta immunoreaktiivisista proteiinimuodoista. Koska biotestit havaitsevat vain funktionaalisen aktiivisuuden, niistä voi olla hyötyä sytokiinien antagonistien tunnistamisessa reaktioseoksesta. Sytokiinien cDNA:iden molekyylikloonauksen ja laajamittaisten ekspressiomenetelmien kehittämisen ansiosta proteiineja on saatavilla lähes rajattomasti biologisia määrityksiä varten. Puhdistettuja proteiineja on myös käytetty immuunipohjaisten määritysmenetelmien, kuten ELISA-testien, kehittämiseen sytokiinien kvantifioimiseksi. ELISA-testit tarjoavat parhaan ja monissa tapauksissa ainoan mekanismin erottaa toisistaan sytokiinit, joilla on merkittäviä päällekkäisiä biologisia vaikutuksia. Sytokiinispesifisten cDNA:iden eristäminen mahdollistaa molekyylitekniikoiden käytön sytokiinispesifisten mRNA-transkriptien tunnistamiseksi. Erittäin herkkä tekniikka transkriptien havaitsemiseksi on RNA-pohjainen polymeraasiketjureaktio (RT-PCR). IL-1:n, IL-6:n, IL-8:n ja TNF:n biologiset määritykset ovat hyvin standardoituja, ja ne kuvataan tässä. Lisäksi kuvataan ELISA:n ja RT-PCR:n yleiset tekniikat.

Vastaa

Sähköpostiosoitettasi ei julkaista.