Regulární článekCytokiny a zánět

Téměř všechny cytokiny zprostředkovávají biologické aktivity buď přímo na imunitních buňkách, nebo na adhezních molekulách, s nimiž imunitní buňky interagují, a lze je proto považovat za prozánětlivé. Několik cytokinů, včetně tumor nekrotizujícího faktoru (TNF), interleukinu (IL)-1, IL-6 a členů rodiny malých cytokinů, má jedinečnou schopnost podporovat buněčnou infiltraci a poškození rezidentní tkáně, které jsou charakteristické pro zánět. Je popsána biologie a techniky stanovení těchto cytokinů. Biologické testy poskytly nejstarší dostupné metody pro charakterizaci cytokinů. Přestože jsou biologické testy potenciálně citlivější než testy založené na imunitním systému, nemusí být schopny rozlišit mezi cytokiny se zkříženě reagujícími aktivitami. Kromě toho mohou být biologické testy falešně negativní vzhledem k přítomnosti inhibitorů, Stále je však užitečné testovat cytokiny podle jejich biologické aktivity. ELISA nerozliší biologicky aktivní od neaktivních, ale imunoreaktivních forem proteinů. Protože biologické testy detekují pouze funkční aktivitu, mohou být užitečné pro identifikaci antagonistů cytokinů v reakční směsi. Molekulární klonování cDNA cytokinů a vývoj rozsáhlých expresních metod zpřístupnily prakticky neomezené množství bílkovin pro biologické testy. Purifikované proteiny byly také použity k vývoji imunologických testovacích technik, jako je ELISA pro kvantifikaci cytokinů. ELISA poskytuje nejlepší a v mnoha případech jediný mechanismus pro rozlišení cytokinů s významně se překrývajícími biologickými aktivitami. Izolace cDNA specifických pro cytokiny umožňuje použití molekulárních technik k identifikaci transkriptů mRNA specifických pro cytokiny. Mimořádně citlivou technikou pro detekci transkriptů je polymerázová řetězová reakce na bázi RNA (RT-PCR). Biologické testy pro IL-1, IL-6, IL-8 a TNF jsou dobře standardizovány a jsou zde popsány. Jsou popsány také obecné techniky pro ELISA a RT-PCR.

.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.